Abstrato:
O C60 fullerene como representante dos nanocompostos de carbono é considerado um agente promissor para aplicação em terapia fotodinâmica devido às suas propriedades físico-químicas únicas. O objectivo deste estudo era estimar a acumulação de C60 fullerene em células de leucemia e investigar o seu efeito fototóxico nas células de leucemia parental e cisplatina resistente. Foi utilizada em experiências uma solução coloidal estável e homogénea em água de C60 pura com um diâmetro médio de nanopartículas de 50 nm. O C60 rotulado fluorescentemente foi sintetizado por conjugação covalente de C60 com isotiocianato de rodamina B. Os resultados da microscopia confocal mostraram que as células de leucemia de Jurkat podiam absorver eficazmente o C60 fullerene do meio. Uma lâmpada de díodo emissor de luz (100 mW cm-2, À = 420-700 nm) foi utilizada para excitação de C60 acumulado. Foi detectada uma diminuição da viabilidade dependente do tempo quando as células de leucemia de Jurkat foram expostas a um tratamento combinado com C60 e luz visível. O efeito citotóxico do fotoexcitado C60 foi comparável ao induzido pelo H2O2, uma vez que ambos os agentes causaram uma diminuição de 50% na viabilidade celular às 24 h em concentrações de aproximadamente 50 μM. Utilizando a análise de immunoblot, foram estimados os níveis de proteína de fosfotirosina nas células.
A acção combinada de C60 e luz visível foi seguida de uma diminuição da fosforilação da proteína celular nos resíduos de tirosina, embora menos intensa do que a induzida por H2O2 ou estaurosporina, um inibidor da proteína tirosina quinase. Todos os agentes testados reduziram a fosforilação das proteínas de 55, 70 e 90 kDa, enquanto que a supressão total da fosforilação da proteína de 26 kDa foi específica para o fotoexcitado C60.
O efeito citotóxico do C60 em combinação com a irradiação da luz visível também foi demonstrado tanto nas células sensíveis à cisplatina como nas células L1210 leucémicas resistentes à cisplatina. Foi demonstrado que o valor relativo do potencial da membrana mitocondrial medido com a sonda de peróxido de éter etílico de tetrametil-rhodamina (TMRE) era menor em células resistentes em comparação com células sensíveis e que a queda no potencial mitocondrial correspondia a uma maior diminuição na viabilidade celular resistente após fotoexcitação de C60. Os dados obtidos sugerem que o tratamento fotodinâmico com C60 é um candidato para restaurar a sensibilidade das células de leucemia resistente a drogas à indução da apoptose mitocondrial.
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