Shrnutí:
Fulleren C60 jako zástupce uhlíkových nanosloučenin je díky svým jedinečným fyzikálně-chemickým vlastnostem považován za slibnou látku pro použití ve fotodynamické terapii. Cílem této studie bylo odhadnout akumulaci fullerenu C60 v leukemických buňkách a prozkoumat jeho fototoxický účinek na rodičovské leukemické buňky a buňky rezistentní na cisplatinu. K experimentům byl použit stabilní a homogenní koloidní roztok ve vodě z čistého C60 o průměrném průměru nanočástic 50 nm. Fluorescenčně značený C60 byl syntetizován kovalentní konjugací C60 s isothiokyanátem rhodaminu B. Výsledky konfokální mikroskopie ukázaly, že leukemické buňky Jurkat mohou účinně absorbovat fulleren C60 z média. K excitaci nahromaděného C60 byla použita světelná dioda (100 mW cm-2, À = 420-700 nm). Když byly leukemické buňky Jurkat vystaveny kombinovanému působení C60 a viditelného světla, byl zjištěn pokles životaschopnosti v závislosti na čase. Cytotoxický účinek fotoexcitovaného C60 byl srovnatelný s účinkem vyvolaným H2O2, protože obě látky způsobily 50% pokles životaschopnosti buněk po 24 hodinách při koncentraci přibližně 50 μM. Pomocí imunoblotové analýzy byly stanoveny hladiny fosfotyrozinových proteinů v buňkách.
Po kombinovaném působení C60 a viditelného světla došlo ke snížení fosforylace buněčných proteinů na tyrozinových zbytcích, i když méně intenzivnímu než při působení H2O2 nebo inhibitoru proteinové tyrozinkinázy staurosporinu. Všechny testované látky snížily fosforylaci proteinů 55, 70 a 90 kDa, zatímco celkové potlačení fosforylace proteinu 26 kDa bylo specifické pro fotoexcitovaný C60.
Cytotoxický účinek C60 v kombinaci s ozařováním viditelným světlem byl rovněž prokázán na buňkách leukémie L1210 citlivých i rezistentních na cisplatinu. Ukázalo se, že relativní hodnota mitochondriálního membránového potenciálu měřená sondou tetrametylrhodamin etylperoxid (TMRE) byla u rezistentních buněk nižší než u buněk citlivých a že pokles mitochondriálního potenciálu odpovídal dalšímu poklesu životaschopnosti rezistentních buněk po fotoexcitaci C60. Získané údaje naznačují, že fotodynamická léčba pomocí C60 je kandidátem na obnovení citlivosti leukemických buněk rezistentních na léčiva vůči mitochondriální indukci apoptózy.