Resumen:
Se sugiere que Fullerene C60 como representante de los nanocompuestos de carbono es un agente prometedor para la aplicación en terapia fotodinámica debido a sus propiedades fisicoquímicas únicas. El objetivo de este estudio fue estimar la acumulación de fullereno C60 en las células leucémicas e investigar su efecto fototóxico en las células leucémicas parentales y resistentes a cisplatino. En los experimentos se utilizó una solución coloidal de agua homogénea y estable de prístina C60 con un diámetro promedio de 50 nm de nanopartículas. La C60 marcada fluorescente se sintetizó mediante conjugación covalente de C60 con isotiocianato de rodamina B. Los resultados de la microscopía confocal mostraron que las células Jurkat leucémicas podían captar de forma efectiva fullereno C60 del medio. Se utilizó una lámpara de diodo emisor de luz (100 mW cm − 2, λ = 420–700 nm) para la excitación del C60 acumulado. Se detectó una disminución de la viabilidad dependiente del tiempo cuando las células Jurkat leucémicas se expusieron a un tratamiento combinado con C60 y luz visible. El efecto citotóxico de C60 fotoexcitado fue comparable con el inducido por el H2O2, ya que ambos agentes causaron una disminución del 50% de la viabilidad celular a las 24 h en concentraciones de aproximadamente 50 μM. Usando el análisis de inmunotransferencia, se estimaron los niveles de proteína fosfotirosina en las células.
La acción combinada de C60 y la luz visible fue seguida por una disminución de la fosforilación de las proteínas celulares en los residuos de tirosina, aunque menos intensiva en comparación con la inducida por la estauroesporina, inhibidor de la proteína de la tirosina quinasa o H2O2. Todos los agentes probados redujeron la fosforilación de las proteínas de 55, 70 y 90 kDa, mientras que la supresión total de la fosforilación de la proteína de 26 kDa fue específica solo para el C60 fotoexcitado.
El efecto citotóxico de C60 en combinación con la irradiación de luz visible se demostró también en células L1210 leucémicas, tanto sensibles como resistentes al cisplatino. Se demostró que el valor relativo del potencial de membrana mitocondrial medido con la sonda de perclorato de éster etílico de tetrametilrodamina (TMRE) fue menor en las células resistentes en comparación con las células sensibles y la caída del potencial mitocondrial correspondió a una mayor disminución de la viabilidad celular resistente después de la fotoexcitación C60. Los datos obtenidos permiten sugerir que el tratamiento fotodinámico mediado por C60 es un candidato para el restablecimiento de la sensibilidad de las células leucémicas resistentes a los fármacos a la inducción de la forma mitocondrial de apoptosis.
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