Samenvatting:
C60 fullereen als vertegenwoordiger van koolstofnanocompounds wordt beschouwd als een veelbelovend middel voor toepassing in fotodynamische therapie vanwege zijn unieke fysisch-chemische eigenschappen. Het doel van deze studie was de accumulatie van C60 fullereen in leukemiecellen te schatten en het fototoxische effect ervan op ouderlijke en cisplatineresistente leukemiecellen te onderzoeken. Een stabiele en homogene colloïdale oplossing in water van ongerepte C60 met een gemiddelde nanodeeltjesdiameter van 50 nm werd gebruikt voor de experimenten. Fluorescerend gelabeld C60 werd gesynthetiseerd door covalente conjugatie van C60 met rhodamine B-isothiocyanaat. Confocale microscopische resultaten toonden aan dat Jurkat-leukemiecellen C60 fullereen efficiënt uit het medium konden absorberen. Een lichtemitterende diodelamp (100 mW cm-2, À = 420-700 nm) werd gebruikt voor excitatie van opgehoopt C60. Er werd een tijdsafhankelijke daling van de levensvatbaarheid geconstateerd wanneer Jurkat-leukemiecellen werden blootgesteld aan een gecombineerde behandeling met C60 en zichtbaar licht. Het cytotoxische effect van door fotocellen opgewekte C60 was vergelijkbaar met dat van H2O2, aangezien beide middelen bij concentraties van ongeveer 50 μM een daling van de levensvatbaarheid van de cellen met 50% veroorzaakten na 24 uur. Met behulp van immunoblotanalyse werden de fosfotyrosine-eiwitniveaus in de cellen geschat.
De gecombineerde werking van C60 en zichtbaar licht werd gevolgd door een afname van de cellulaire eiwitfosforylering op tyrosineresiduen, zij het minder sterk dan die welke werd geïnduceerd door H2O2 of de proteïne tyrosinekinaseremmer staurosporine. Alle geteste stoffen verminderden de fosforylering van de 55, 70 en 90 kDa-eiwitten, terwijl de totale onderdrukking van de fosforylering van het 26 kDa-eiwit specifiek was voor met licht geëxciteerd C60.
Het cytotoxische effect van C60 in combinatie met bestraling met zichtbaar licht werd ook aangetoond op zowel cisplatine-gevoelige als cisplatine-resistente L1210-leukemiecellen. Aangetoond werd dat de relatieve waarde van de mitochondriale membraanpotentiaal, gemeten met de tetramethylrhodamine ethyl ether peroxide (TMRE) sonde, lager was in resistente cellen vergeleken met gevoelige cellen en dat de daling van de mitochondriale potentiaal overeenkwam met een verdere daling van de resistente levensvatbaarheid van de cellen na C60 fotoexcitatie. De verkregen gegevens suggereren dat fotodynamische behandeling met C60 een kandidaat is voor het herstellen van de gevoeligheid van geneesmiddelenresistente leukemiecellen voor mitochondriale inductie van apoptose.
Nederlands
Français
English
Deutsch
Español
Русский
Čeština
Italiano